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Caco-2 细胞渗透性试验

2023-08-08
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arrow.png Caco-2渗透性测试(Caco-2 Permeability Assay)是一种常用的体外实验方法,用于评估化合物在人体肠道中的吸收程度和渗透性。
Caco-2组织人休癌细胞膜就是种全人类直肠癌组织人休癌细胞膜系,长用于模拟网人休直肠上皮组织人休癌细胞膜层的基本特征和功效。这样组织人休癌细胞膜系首轮从1974年位有直肠腺癌的女性的良性肿瘤中离出来的,被命名大全为Caco-2。

Caco-2细胞(来源--ATCC).jpg

Caco-2内部(由来: ATCC)Caco-2侵入工作会更性测试测试(Caco-2 Permeability Assay)都是种较常用的休外试验步骤,用来评诂类化合物在人体肌肉肠内中的吸附的情况和侵入工作会更性。当药用服食行业分享时,药的吸附的情况和侵入工作会更性是首要的药代原因学参数指标。因为全人类直肠癌组织组织内部株Caco-2的特征,也应该应该通过仿真结肠上皮组织组织内部层的实际情况,来预測无机化合物的口服液菌物利用率度。在Caco-2组织组织内部培养教育在浸入聚氨酯膜上时,也应该生成同一个双层构成上皮组织组织内部,也应该主要用于仿真人肠上皮组织组织内部的的基本特征,生成顶膜侧(apical,AP)和肌底里侧(basolateral,BL)构成,能在顶膜表明多样性出刷状缘毛毛。与PAMPA(水平线人员膜浸入试验装置)相对应于,Caco-2组织组织内部具有着通量较低,投入较高的优点和缺点,第三Caco-2组织组织内部也应该直接短时间筛分大规模量用量,必备要的药量较少,相对应于昆虫模式在于,是相对应经济社会省时的选定 。从而,coca-2也应该把你想表达出来消化道轉運体和酶,有将会预測活跃轉運和有好几种轉運体的用量共同用处。

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以下为Caco-2细胞渗透性试验的一般步骤:

(1) 应先前加工必须将Caco-2组织生殖体组织细胞锻炼在多孔透明的的锻炼膜上,生成两个组织生殖体组织细胞双层结构,一般是必须14-28天。在锻炼方式中,保持Caco-2组织生殖体组织细胞提升一段的分解度,以更加好地模拟系统肠上皮组织生殖体组织细胞层。(2) 将待测的类化合物添加到HBSS中,让其与Caco-2组织细胞玩。(3) 让上皮细胞在孵育箱中以稳态的室温、湿球温度和CO2溶液浓度下培育一段话时光,一般说来为2小时内。(4) 在孵育完后,区别整理最上层液(在上皮组织左正中间)和最底层液(凭借上皮组织层走进孔洞膜正中间)。动用适合的的方法,举例高液质色谱法(HPLC)或液质质谱联使用(LC-MS),量测样板中化学物质的溶度。(5) 顺利通过更加第一层液和顶层液中有机类化合物的溶液浓度,折算出有机类化合物的经过率、吸引浓度或是想关想关数据。抗癫痫药物在 Caco-2受损细胞三层沙盘模型中的表观融入指数(apparent permeability coefficient ,Papp )的折算出 :Papp=dCr/dt×Vr×1/A ×1/C0 。 Papp政府部门为 cm/s 。
Caco-2神经元构建性可靠性实验是可以带来有关系无机单质在养成胃肠道作用下的消化功效的主要资讯。根据量测无机单质根据神经元层的作用,测试其被消化到反复控制系统中的成长性,并精准预测其在里面的药代趋势学做法。这对中成药研制和口服用中成药的动物用度测试至关首要。仅是还是所需特别注意,Caco-2神经元构建性可靠性实验是一种种身体之外方案,其实是可以带来要用的参考价值动态数据,但在其实app中仍所需通过一些缘由基础性测试无机单质的消化功效和构建性。

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参考文献:
1. Xiu-wei Yang, Xiao-da Yang, Ying Wang, Lian Ma, Yue Zhang, Xiao-gai Yang, Kui Wang. Establishment of Caco-2 cell monolayer model and standard operation procedure for assessing intestinal absorption of chemical components of traditional Chinese medicine. Journal of Chinese Integrative Medicine, 2007, 5(6): 634-641.2. 王莎, 刘斯琪, 丁鹏敏, 庞月笙, 陶志, & 王如峰. (2020). 休外建模在中西药细胞代谢探讨中的适用. PROGRESS IN PHARMACEUTICAL SCIENCES, 44(2), 119-132.
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