- 心脑血管疾病泛指由于高脂血症、血液黏稠、动脉粥样硬化、高血压等所导致的心脏、大脑以及全省组织发生的缺血性或出血性疾病。我国心脑血管每年治疗费用支出5406亿元,脑血管疾病每年治疗费用占心脑血管疾病25.68%,其中,缺血性脑卒中占比18%,出血性脑卒中占比7%。脑中风主要有缺血性中风(短暂性脑缺血发作、动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞、腔隙性脑梗塞、脑栓塞)、出血性中风(脑出血、蛛网膜下腔出血)两大类。
重大疾病标题 ICD 10源代码 应对模特 脑留血 I60-I62 脑部自体血注射器,蛛网膜下腔内出血 脑干梗塞 I63 缺血性性脑卒中整治 脑卒中 I64 脑血栓 I65 脑栓塞 I66 相关 I67-I69 另外
- 动物模型:局灶性脑坏死:MCAO/R对模型-线栓法、栓塞法、光电学法等全脑脑供血不足:心血管夹闭法
- 体外模型:氧糖违背绘图双氧水等促使的脱色应激状态模式另外:Transwell 法检查 BBB 因素、离体脑切块、运动神经动脉单无等
- 缺血性脑卒中和出血性脑卒中是脑血管系统最常用的药效学评价系统,由于大脑中动脉栓塞模型 MCAO(Middle Cerebral Artery Occlusion)的发病机理与人类缺血性脑卒中表现相似,对于制作模拟人脑缺血模型对脑缺血发病机制及药 物筛选有重要意义,是美国国立卫生研究院(National Institutes of Health,NIH)和卒中治疗学术产业圆桌会议(Stroke Treatment Academic Industry Roundtable,STAIR)重点推荐药效学评价体系。
- 在试验中通常使用经典的线栓法建立模型:分离暴露颈部血管,从颈外动脉(external carotid artery,ECA) 或颈总动脉(common carotid artery,CCA) 分叉处插入尼龙线,进入颈内动脉 (internal carotid artery,ICA),阻断大脑中动脉(Middle Cerebral Artery,MCA)起始端及其所有侧支血液供应,导致 MCA 区局灶缺血。
- 欧宝体育app MCAO模型系统评价体系的优势模型评估是检验结果的关键步骤。欧宝体育app 严格遵循STAIR脑卒中临床前药物开发策略指导,拥有丰富的MCAO模型建立经验和成 熟的MCAO模型系统评价体系:病灶比较稳定,高取得胜利率,高自愈率的大鼠、小鼠MCAO模式化;准确行之有效的量效时间关系的口碑;可搞定简短性脑血管痉挛性和超级qq会员性脑血管痉挛性的药用价值品价;可按照其STAIR水平规范需求,成功多效果学基本点公式考虑;可通过客设计符合要求,对唯一性急病啮齿类甲壳动物通过造模并进行化学活化评论。
研究目的 模型类型 / 试验方法 动物种属 考察指标 量效关系-时效关系 MCAO 模型 小鼠 • 脑梗死体积
• 脑含水量
治疗时间窗 • 脑梗死体积
• 脑含水量
• 脑体积
行为学表征 • Zea-longa评分
• 平衡木通过时间
• 转棒滞留时间
• 抓握力
综合评价 大鼠 • 脑梗死体积
• 行为学评分
抗凝血功效 毛细玻管法 小鼠 凝血时间
- 动物:ICR小鼠,雄性组别: 对照组,模型组,阳性药组(先必新 )考察指标:TTC法考察梗死体积,烘干法考察脑含水量。方法:• 线栓法对小鼠右侧中动脉进行阻断,阻断1h后拔除线栓,实现再灌注。• 量效考察:动物分别在梗死后0.5h静脉注射给药阳性药先必新20,10,1,0.1和0.01mg/kg,考察量效关系。• 时效考察:动物分别在梗死后0.5h以及再灌注后2h,6h,8h和10h静脉注射给予阳性药先必新20mg/kg,考察时效关系。
- TCC 染色法TCC 染色法是对缺血脑组织进行染色观察的常见手段,具体操作为迅速将大鼠大脑取出,用冷盐水冲洗后,快速放于 -20℃ 冰箱中放置 10 分钟,待脑组织稍硬后,取出切掉嗅球、垂体、低位脑干,由前向后冠切片,均匀切成 2 mm 厚脑片,等 分切成 5 片,置于 1%TTC 溶液中,37℃ 避光孵育 30 分钟,每隔 5 分钟左右翻动一次。TTC 可与正常组织内的脱氢酶系统反应被还原为玫瑰红色,因此使组正常组织染呈玫瑰红色,梗死组织呈白色。量效关系考察(TTC和脑含水量)( mean±SEM)时效关系考察(TTC和脑含水量)( mean±SEM)
- 动物:ICR小鼠,雄性组别:对照组,模型组,阳性药组(先必新 )考察指标:TTC法考察梗死体积,排水法考察脑体积,烘干法考察脑含水量。方法:• 线栓法对小鼠右侧中动脉进行阻断,阻断1h,2h和4h后拔除线栓,实现再灌注。• 治疗时间窗考察:动物分别在梗死后0.5h静脉注射给药阳性药先必新20mg/kg,考察治疗时间窗。毕竟治疗时间窗考察 A:TTC;B:脑体积,C:脑含水量 (mean±SEM)
- 动物:ICR小鼠,雄性组别:对照组,模型组,阳性药组(先必新 )考察指标:Zea-longa评分,平衡木通过时间,转棒滞留时间,抓握力方法:• 线栓法对小鼠右侧中动脉进行阻断,阻断1h后拔除线栓,实现再灌注。• 神经功能恢复考察:动物分别在梗死后0.5h静脉注射给药• 阳性药先必新20mg/kg,考察治疗时间窗。
- MCAO小鼠模型评价系统—神经功能考察神经功能药效学考察: A: Zea-longa评分;B: 平衡木通过时间神经功能药效学考察: C: 转棒滞留时间;D: 抓握力(mean±SEM)
- 动物:SD大鼠,雄性组别:对照组,模型组,阳性药1组(依达拉奉 ),阳性药2组(尼莫地平)考察指标:Zea-longa评分, TTC法考察梗死体积方法:• 线栓法对大鼠右侧中动脉进行阻断,阻断2h后拔除线栓,实现再灌注。• 药效学考察:动物分别在梗死后0.5h静脉注射给药阳性药,考察两阳性药药效学作用。
- 大鼠行为学考察 (Zea-longa评分和动物行为)眼神呆滞经系统疵点:0 分;欧宝体育app 器瘫痪侧前爪可以是完全伸展:1 分;行离开时向截瘫侧转圈:2 分;行离开向崩溃侧私倒:3 分;可以自行走路,产生察觉损失后果:4 分。
- 结果-1:大鼠的行为学评分
- Result-2:TTC staining of brain脑梗死体积考察( TTC染色和梗死体积比)