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酵母菌蛋白表达系统

酵母表达系统兼有原核和高等真核系统的优点,具备培养条件普通、生长速度快、成本相对较低、能进行蛋白翻译后加工、易获得可溶性活性重组蛋白等特点,被广泛用于重组蛋白尤其是真核蛋白的生产制备。其中巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)因其生长速度快、商业化表达载体丰富、可获得高效的分泌表达等优点,使其成为酵母表达重组蛋白的优先选择。
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欧宝体育app 科研人员建立了成熟的酵母表达纯化欧宝体育app 平台,提供优质的重组蛋白在毕赤酵母中的表达与纯化欧宝体育app 。


  • 酵母表达系统欧宝体育app 项目:
    并购重组酵母菌表达方式质粒创设;并购重组质粒电转化成;重新组合表达方式子筛分;一些小规模性球蛋白呈现和纯化(2L教育细胞塑造液教育塑造终产物);发现并规模性化蛋清展示和纯化(10L上述)。
工作步骤之一
步骤实验内容实验时间备注
1重组酵母表达质粒构建2 周可选择不同载体;不同亲和标签;分泌或胞内表达
2重组质粒电转化1周不同表达菌株可选, PCR 鉴定5-10个克隆
3重组表达子筛选3-4周5-10个克隆筛选, Zeocin抗生素浓度筛选重组子,结合Western blot 方法鉴定重组蛋白表达
4小规模蛋白表达和纯化2-4周优化培养基,菌体密度,甲醇浓度,诱导时间等
5大规模蛋白表达和纯化根据表达体积商定可选择摇瓶或者发酵罐培养
备注
Remarks
您可要根据调查需求量选择所述某一调查內容,或涉及到的调查內容的组合名字纯化时选取亲和纯化、正离子柱纯化、疏水塑料填料纯化和碳原子筛纯化; 蛋清这种基本特征,描述设计的挑选会影晌最中蛋清的纯净度和灵活性。
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